Media enrichment adalah
media yang diperkaya dengan zat-zat tertentu sehingga dapat menyuburkan
pertumbuhan mikroba yang hendak diisolasi. Yang termasuk media enrichment
antara lain BHIB, TSB , SCB, dan APW.
Media pengaya, dipergunakan dengan maksud
“memberikan kesempatan” terhadap satu jenis/kelompok mikroba
untuk tumbuh dan berkembang lebih cepat dan
jenis/kelompok lainnya yang sama-sama berada dalam satu
bahan. Misalnya untuk memindahkan bakteri penyebab
penyakit tifus dari bahan tinja (kotoran manusia). Tetapi
media pengaya telebih dahulu, mungkin yang akan tumbuh dan berkembang adalah semua jenis kelompok yang ada di dalam bahan,
karena di dalam tinja bukan hanya puluhan tetapi mungkin ratusan
jenis dan mikroba yang akan didapatkan. Dengan media
pengaya seperti kaldu selenit ataupun kaldu tetrationat,
maka kesempatan untuk pertumbuhan dan perkembangbiakkan
mikroba lain akan terhambat/terhenti untuk waktu-waktu
tertentu, tetapi tidak untuk salmonella. Misalnya dalam waktu
antara 18-22 jam, maka kemungkinan besar mikroba lain akan terhambat dan salmonella akan tumbuh, sehingga kalau kemudian dibiakkan kedalam media selanjutnya, jenis tersebut yang besar kemungkina akan didapatkan.
Media
ini diperkaya
dengan kandungan nutrien tertentu dalam rangka
mengoptimasi pertumbuhan bakteri
tertentus.Selain nutrient, bias juga ditambahkan 1). Bahan penghambat bakteri
lain, 2). Indikator selektivitas.
TSB
(Trypticase Soy Broth)
adalah medium dasar untuk menumbuhkan berbagai mikroorganisme. Trypticase Soy
Agar digunakan untuk medium pertumbuhan dengan tujuan: mengamati morfologi
koloni, mengembangkan kultur murni, pertumbuhan untuk tes biokimia. TSA juga
biasa digunakan untuk penghitungan jumlah bakteri.
Alat dan Bahan :
- Neraca teknis - Serbuk selenite
broth 1,9 gram
- Beaker glass - Serbuk Trypic Soy Broth sebanyak 3 gram
- Labu Erlenmeyer - Serbuk BHIB sebanyak 3,7
gram
- Batang pengaduk -
Pipet pastur plastik
- Spatel -
Aquadest
- Tabung reaksi -
Koran
- Cawan kaca -
Autoklaf
- Lemari pendingin (Kulkas) - Waterbath
- Kapas dan kasa
Cara Kerja :
1.
Media Selenite Broth
Ø
Alat dan bahan disiapkan
Ø
Kemudian di timbang beaker glass di neraca teknis,
kemudian tambahkan 1,9 gram serbuk selenite broth.
Ø
Kemudian ditambahkan 100ml aquadest ke dalamnya. Diaduk
hingga homogen.
Ø
Setelah homogen, larutan dimasukkan ke dalam tabung
reaksi ( 30 buah ). Masing masing tabung mempunyai volume yang sama.
Ø
Setelah semua tabung terisi rata, mulut tabung ditutup
menggunakan kapas, kemudian di sterilkan di dalam autoklaf.
Ø
Setelah disterilkan, tabung diberi etiket, kemudian
disimpan di tempat yang sesuai.
2.
Media BHIB
Ø Alat da bahan disiapkan.
Ø
Kemudian ditimbang
serbuk BHIB sebanyak 3,7 gram.
Ø
Setelah itu, ditambahkan aquadest sebanyak 100ml,
dihomogenkan.
Ø
Apabila setelah homogen larutan tidak terlihat jernih,
panaskan larutan dalam waterbath sambil diaduk-aduk hingga larutan menjadi
kuning jernih.
Ø
Setelah jernih,larutan didiamkan sebentar, kemudian
dimasukkan ke dalam 30 tabung reaksi. Masing-masing tabung reaksi mempunyai
volume yang sama.
Ø
Mulut tabung reaksi ditutup dengan kapas, kemudia
disterilkan dalam autoklaf.
Ø
Setelah itu, tabung diberi etiket, kemudian disimpan di
tempat yang sesuai.
3.
Media Trypic Soy Broth
Ø Alat dan bahan disiapkan.
Ø Kemudian ditimbang serbuk Trypic Soy Broth sebanyak 3 gram,lalu dilarutkan
dengan aquadest sebanyak 50ml di dalam erlenmeyer, dihomogenkan.
Ø
Setelah homogen,larutan dipanaskan hingga larutan
benar-benar menjadi homogen.
Ø
Lalu mulut erlenmeyer ditutup dengan kapas yang dibalut
dengan kasa,tutup mulut tabung menggunakan koran. Kemudian disterilkan di autoklaf dengan suhu
121 derajat celcius.
Ø
Setelah disterilkan, media dituang ke dalam cawan kaca
yang telah disterilkan terlebih dahulu. Media dituang dengan cara aseptik, dan
cawan kaca hanya terisi 1/3 dari volume cawan kaca.
Ø
Setelah media dituang, kemudian tunggu hingga dingin dan
mengeras.
Ø
Cawan kaca diberi etiket, kemudian disimpan di lemari
pendingin dengan tutup cawan menghadap ke bawah.
Hasil :
Dalam praktikum kali ini
dihasilkan :
1. Media Selenite Broth sebanyak 100 ml
2. Media BHIB sebanyak 100 ml
3. Media Trypic Soy Broth sebanyak 50 ml
Pembahasan :
· Perhitungan BHIB :
Pada botol tertera aturan pakai 37 gram/liter. Sedangkan
yang akan dibuat 100 ml, maka berat BHIB yang dibutuhkan adalah:
37/1000 x 100 = 3,7 gram
